Prof. Kamaruzaman Referee for Mehran Avakh Keysami

Master of Science Certificate

http://keysami.persiangig.com/%D9%81%D9%88%D9%82%20%D9%84%D9%8A%D8%B3%D8%A7%D9%86%D8%B3.jpg

VAM congress.doc

http://keysami.persiangig.com/Prof.%20Razak%20Referee.bmp

Prof. Razak Referee.bmp

http://keysami.persiangig.com/Prof.%20Razak%20Referee.bmp

Microbiology Congress.doc

http://keysami.persiangig.com/Microbiology%20Congress.doc

Ph D certificate (Melau)

http://keysami.persiangig.com/Mehran%20PHD%20Certificate%20%28Malayu%29.JPG

ITEX07-FINAL RESULTS

http://keysami.persiangig.com/ITEX07-FINAL%20RESULTS.xls.pdf

Protection of prawn from Aeromonas

http://keysami.persiangig.com/Protection%20of%20prawn%20from%20Aeromonas.pdf

Pathogenicity challenge test

http://keysami.persiangig.com/Pathogenicity%20challenge%20test.pdf

Protection of prawn from Aeromonas.

http://keysami.persiangig.com/Protection%20of%20prawn%20from%20Aeromonas.pdf

Level of Probiotic

http://keysami.persiangig.com/Level%20of%20Probiotic.pdf

Larval Growth Development using Probiotic

http://keysami.persiangig.com/Larval%20Growth%20Development.pdf

Isolation and Identification of Bacteria

http://keysami.persiangig.com/Isolation%20and%20Identification%20of%20Bacterial%20flora.pdf

شرکت شن و ماسه جانشین نخستین ایستگاه تکثیر ماهی در ایران

---

شرکت شن و ماسه جانشین نخستین ایستگاه تکثیر ماهی در ایران

 

دکتر مهران آوخ کیسمی

استادیار آموزشی  وزارت جهاد کشاورزی

 

در سفری که اخیرا به زادگاهم کیسم داشتم تغییر و تحول طبیعت سبز و مصفای اطاف رودخانه ی سفید رود ، چشک گیر تر شده و به همان نسبت ابهت و دفتر دستک شرکت شن و ماسه کیسم شمال رونق بیشتری یافته بود . با این وصف ، جالبتر این بود که خیل زیادی از مردم دور و نزدیک که بین آن ها به ندرت چهره ای آشنا دیده می شد ، با عشق و علاقه تفریح و صفای اوقات فراغت خود را با نام سفید رود تقسیم کرده بودند و با گشت و گذار ، شنا و نوسواری ( قایق سواری ، نو یک قایق چوبی ساخت مردم محلی است ) و ماهیگیری ورزشی از حریم پرطراوت سفید رود دفاع می کردند . مشاهده این منظره و این هیاهو ، انگیزه ای تهیه گزارشی بود که در پی داریم .

 

به هنگام مسافرت از رشت به طرف مازندران ، در انتهای جاده کمربندی آستانه اشرفیه تابلوی سبز رنگ بزرگی به چشم می خورد که روی آن کیسم ، با فلش مشخص شده است . کیسم در طول جغرافیایی 56/49 و عرض 15/37 با وسعتی حدود 250 کیلومتر مربع در جنوب شرقی شهرستان آستانه اشرفیه واقع شده است . کیسم در گذشته مقر حکومت خانواده کیا بوده و در حال حاضر آرامگاه سید حسین کیا در این محل زیارتگاه مشتاقان است . کیسم در مرکز مثلث جلگه مرکزی گیلان که رئوس آن را امام زاده هاشم ، چمخاله و انزلی تشکیل می دهند قرار گرفته و از چهار طرف به وسیله سپید رود و نهر حشمت رود احاطه شده است که به وسیله ی یک پل خشتی قدیمی در شمال و یک پل جدید در جنوب ، با دو طرف خود ارتباط پیدا می کند . پنج کیلومتر از طول 800 کیلومتری سپید رود به صورت حرف L ، جنوب و غرب کیسم را محصور کرده است . مردم کیسم گیلک هستند و در گفتار خود گیلکی را به کار می برند و همه فارسی بلدند . بارندگی سالانه به 1200 میلی متر می رسد . میانگین حرارات گرمترین ماه سال 21 درجه سانتی گراد و سردترین ماه سال 6 درجه سانتی گراد است . هر سال زمستان 2 تا 3 بار برف می بارد که از نیم متر تجاوز نمی کند . رود پر آب و دایمی سفیدرود ، خاک حاصل خیز و رطوبت و باران فراوان ، آب و هوای معتدل و مساعد و روح پرور ، امرار معاش در کیسم را آسان نموده که به صورت مثلی معروف در آمده است : << اگر زمانی خواستی دستت را در آب بشویی ماهی ، به خاک چنگ بزنی بادام زمینی ، بالاتر از روی خاک صیفی جات و بالاتر از آن بوته چای و باز هم بالاتر برنج و مرکبات و چون می ایستی میوه و کمی بالاتر روی ترنبار و کتام پیله ابریشم قابل استحصال و تامین معاش است . به علاوه اضافه کار خانواده ها در شب های طولانی زمشتانی صنایع دستی متنوع حصیربافی شامل : حصیر ، زیر انداز ، کلاه ، خورجین و سفره و نیز سفال سازی ، خراطی و توربافی و ساخت قایق چوبی (نو) می باشد . کیسم مهمترین مرکز کشت برنج آستانه اشرفیه ، از تولید بالایی در پیله ابریشم ، چای ، بادام زمینی ، حبوبات و صیفی جات برخوردار است ، اما از گذشته دور مهمترین منبع در آمد و ارتزاق کیسمی ها رودخانه سفید رود بوده است . سپید رود بسیار خوش منظره و آرام است . کناره های بلند و نیز پست و هموار آسفالت شده ، درختان و بوته های متنوع سایه دار ، در کنار رودخانه ، فضای باز و آزاد برای ماهیگیری تفریحی ، برکه های کناره ای ، مسیر پیچ و خم دار ، جریان آب با سرعت های مختلف حتی حوضه باتلاقی در پایین محله کیسم ، سکوهای طبیعی و پل مصنوعی روی رودخانه ، این محیط پرجاذبه و متنوع را برای انواع مختلف جانوران و پرندگان به صورت مامن مناسب ، در آورده است . انواع حواصیل از جمله اگرت پرنده کاملا مشخص کناره آب است . بیشترین تغذیه و فعالیت حواصیل ها ، در گرگ و میشی هوا ، سپیده دم و شامگاه است . تجمع آن ها اغلب ما را در پیدا کردن ایستگاه ماهیگیری مناسب ، راهنمایی می کند . به علاوه اردک ها ، کشیم ، راسو ، سمور ، شغال از جانوران جالب و غالب منطقه به حساب می آیند . آرامش طبیعی رودخانه همراه با زوزه ی شغال ، غار و غور قورباغه و صدای پرندگان عجین شده است .

 

 

 روزگاری کیسم بزرگترین ایستگاه نیمه مهاجر و مهاجر خزر به ویژه ماهیان خاویاری و ماهی سفید بوده است .

         

نخستین ایستگاه تکثیر مصنوعی شیلات ایران در سال 1301 در کیسم 5 کیلومتری جنوب پل احداث شد . حوضه سپید رود در کیسم از نظر صید ماهی خاویاری و تهیه خاویار و تکثیر طبیعی و مصنوعی از لرزش اقتصادی ویژه ای برخوردار بوده است . تکثیر مصنوعی ماهی خاویاری در پایین محله کیسم منطقه ای پر آب و عریض تحت نظر انستیتو ماهی شناسی شیلات انجام می شد . تکثیر از نیمه فروردین شروع شده و تا اواخر خرداد  ماه ادامه داشت . پیش تر وسابل مورد نیاز از قبیل انکوباتور ، ماشک ، پره و لگنچه و چادر با وسایل مختصر زندگی در این نقطه فراهم می شد و به طریق ابتدایی ماهیان خاویاری تکثیر و به صورت لارو ، به رودخانه رهاسازی می شدند . به طوری که در سال 1307 سه میلیون لارو به سفید رود ریخته شد . ماهیان مولد خاویاری ، از دریای خزر به منظور تخم ریزی در بستر مناسب و زیستگاه مساعد سفیدرود در رودخانه بالا آمده و در این منطقه ماهیان مولد با ماشک و پره صید می شوند .

 

  ماشک عبارت از توری مخروطی شکل است که به دور قاعده ی آن دانه های سرب آویخته شده و در نقطه راس به یک طناب متصل است . وقتی آن را به داخل آب می اندازیم دهانه ی قاعده ماشکبه دلیل دارا بودن گلوله های سربی ، به یکدیگر نزدیک شده و ماهی در آن به دام می افتد .

 پره تور وسیعی که آن را در رودخانه ریخنه و با سد کردن مسیر مهاجرت ماهی اقدام به صید می نمایند

 

 در صورتی که ماهی مولد آماده تخم ریزی نبوده باشد ، ماهی مولد را جهت آمادگی جنسی و رسیده شدن تخمدان و بیضه ، با یک طناب داخل رودخانه بسته و در نقاط آرام رودخانه نگه داری می کنند .

بعد از احداث پل آستانه در جاده رشت – مازندران بر روی رودخانه سپید رود که جهت استحکام دارای سکوی بلندی داخل آب بود راه مهاجرت تاس ماهیان به سپید رود بسته شده و تخم ریزی ماهیان مهاجر و نیمه مهاجر در حوضه سفیدرود محدود گشت . پل آستانه یکی از موانع مهم مهاجرت تاس ماهیان به نقاط تخم ریزی طبیعی خود بود و بدین ترتیب کارگاه تکثیر ماهیان خاویاری کیسم ، تعطیل شد . هم اکنون درست در مکان قبلی کارگاه شن و ماسه ی کیسم شمال با قدرت و تکنولوژی پیشرفته ، اما با رسالتی دیگر استقرار یافته است و اگر کارگاه تکثیر کار حفظ و ازدیاد ذخایر را انجام می داد این شرکت با تخریب و استحصال بی وقفه شبانه روزی شن و ماسه ، بستر رودخانه و این زیستگاه پر آب و عریض ماهیان مهاجر و نیمه مهاجر را محدود می کند . به دور از این هیاهو و بهره برداری کوتاه مدت ، هنوز مردم با صید و صیادی در این بخش ارتزاق می کنند و هنوز هم این منطقه یکی از مکان های مهاجرت اوزون برون و ماهی سفید می باشد . عمده ترین ماهی های مهاجر به این رودخانه عبارتند از : اوزون برون ، تاس ماهی ، ماهی سفید ، کپور معمولی ، سس ماهی ، لای ماهی ، اسبله ، سفید کولی ، شاه کولی ، سیاه کولی ، سیم و کلمه می باشند .

 

در این میان عملیات انتفاعی بلند مدت ، که به طور حتم بر عملیات انتفاعی زودگذر ترجیح داده می شود گشت تفریحی با قایق چوبی (نو) به منظور ماهیگیری تفریحی و ورزشی و شکار کشیم و اردک با تفنگ بادی در کناره های باتلاقی پایین محله کیسم و مخصوصا شنا در آب شفاف ، تمیز و  فاقد آلودگی میکروبی و شیمیایی سفید رود ، از اولویت برخوردار است . اکنون این منطقه آبی به خصوص در فصل پیله و ابریشم فروردین تا مرداد که خیل تجار به زیارت حرم مطهر آقا سید جلاالدین اشرف فرزند موسی بن جعفر (س) و تجدید دیدار با مرقد استاد دکتر محمد معین و گذراندن اوقات فراغت و تعطیلات به شهرستان آستانه اشرفیه می شتابند ، در خط هفت کیلومتری جاده آسفالبه ی آستانه به کیسم در کنار مزارع سبز و خرم برنج ، چای و رودخانه ی سپیدرود به تفرج و تماشا می پردازند . مهمترین فعالیت تفریحی رایج منطقه ماهیگیری با قلاب است . در تمام اوقات سال به خصوص فصل پیله و ابریشم ده ها نفر از مردم پیر ، جوان  و نوجوان ، زن و مرد که بومی و یا مسافرند در قسمت های مختلف ساحل ، داخل آب ، یا روی نو مستقر شده و به ماهیگیری مشغولند . با توجه به محل ماهیگیری از رشته تک قلاب یا رشته 5 قلاب استفاده می کنند و اغلب مسافران با خود لانسر دارند . نوع طعمه مورد استفاده برای قلاب کرم خاکی ، خمیر نان ، شفیره کرم ابریشم و روش (گاماروس) دریای خزر است . خط کناره سفیدرود در کیسم آسفالت بوده و به این ترتیب می توان خودرو را در کناره ی آب پارک کرد و با آسایش خاطر و امنیت کامل از مناظر پر جاذبه و سرسبز گیلان بهره مند شد . در کیسم هنوز طبیعت آن قدر زنده است که مردم برای برنامه ریزی ماهی گیری ورزشی خود ، از هواشناسی محلی کمک می گیرند . بدین شکل که اگر شغال ها زوزه بکشند و سک زوزه ی آن ها را جواب گوید فرا ی صاف و آفتابی در پیش خواهد بود . اما اگر زوزه ی شغال در شب مزاحم آرامش باشد در خوبی هوا جای تردید است . غار و غور قورباغه ی شالیزار و برکه ها حاکی از خوبی هوای فردا ، ولی سرو صدای قورباغه ی سبز درختی و تنبلی و کسالت مار آبی که روی بوته های خشک لمیده باشد حاکی از بارندگی زودرس است . از آنجا که مردم بومی روزگاری به کار تکثیر در مقیاس کوچکتر اغلب در پرورش ماهی ، تکثیر و پرورش ماهی قرمز و ماهی های آکواریومی فعالند ، چه در امر صید و شکار ماهی و چه در امر شکار جانور و پرنده ، اصول حفاظت حیات وحش و محیط زیست را در امر بهره وری ، به عنوان یک وظیفه مستمر و تردید ناپذیر باور دارند و پیوسته نظارت می کنند تا مسافران نیز اصول حفاظت حیات وحش را در ابزار ، میزان تولید و نوع صید مراعات کنند . این همه تلاش و محبت مردم نشان می دهد به شدت به زیبایی طبیعی و طبیعت مصلای پر از ماهی و پرنده وابسته هستیم و حاکی از این واقعیت است که شرکت شن و ماسه ، جانشین مناسبی برای نخستین کارگاه تکثیر شیلات در ایران نخواهد بود .

 

Abstract of the thesis presented to the Senate of Universiti Putra Malaysia in fulfilment of the req

Abstract of the thesis presented to the Senate of Universiti Putra Malaysia in fulfilment of the requirement for the degree of Doctor of Philosophy

 

Assessment of Putative Bacteria as Probiotics in Juvenile FRESHWATER PRAWN, Macrobrachium rosenbergii (de Man)

 

By

MEHRAN AVAKH KEYSAMI

June 2006

Chairman:    Associate Professor Che Roos Saad, PhD

Faculty    :     Agriculture

 

A study focused on the use of putative bacteria as probiotics to reduce nutritional and disease problems in aquaculture industry was carried out. This study was conducted in 8 experiments to investigate juvenile M. rosenbergii putative bacterial flora as probiotics, for enhancement of growth and survival of juvenile M. rosenbergii during November 2002 to August 2005 at University Putra Malaysia.

 

Bacterial counts and the putative bacterial flora in juvenile M. rosenbergii cultivation (0.1-9.0 g), were investigated and the isolated strains were classified to genera. Total viable cell counts were 96±2.6×10⁴ CFU/ml for culture water, 3100±169.0×10⁴ CFU/ml for culture tank sediment, 2100±143.0×10⁴ CFU/ml for prawn body surface, 14000±4.6×10⁴ CFU/g for prawn digestive tracts and 5.6±2.8×10⁴ CFU/g for prawn abdominal muscle. Altogether, 12 genera were identified from water, sediment and different organs of prawn. The most frequently isolated ones were Bacillus, Aeromonas and Pseudomonas.

 

The three groups of putative bacteria (Bacillus subtilis, Micrococcus luteus and Corynebacterium ammoniagenes), collectively showed antagonistic activity against the six pathogens in antibacterial activity test. B. subtilis showed greatest inhibition of pathogens in well and disc diffusion assays and cross-streak method. Addition of 10 ml of cell free supernatant of B. subtilis to pathogens resulted in complete suppression of it within 12 h. Maximum growth and maximum zone of inhibition against A. hydrophila was observed at 30 ^oC and at pH 8 with 1% NaCl, respectively.

 

A ranking index (RI) was calculated to screen potential aquaculture probiont. The RI is based on the doubling time (td) and lag period (λ) obtained from the growth profile of each bacterium. Three candidates (B. subtilis, M. luteus and C. ammoniagenes) and two pathogens (A. hydrophila and Pseudomonas aeroginosa) were grown in TSB broth and absorbance recorded at each 0.5 h during 24 h period. The B. subtilis grew equally as well as the pathogens and candidate B. subtilis had a faster specific growth rate (μ=0.034) than the other candidates, M. luteus (0.031) and C. ammoniagenes (0.032) respectively.

 

Sensitivity of juvenile prawns to two putative bacteria strains (B. subtilis and A. hydrophila) was examined using in vitro and in vivo pathogenicity challenge test. In vitro challenge test was done on juvenile prawn (0.1 g) using the immersion method. An in vivo challenge experiment was carried out using the feeding trial method. The result of in vitro and in vivo pathogenicity tests indicated that the survival of juvenile (0.1 and 0.45 g) was not affected by the presence of B. subtilis in fresh water but, A. hydrophila infected juvenile M. rosenbergii and cause about 78.67% mortality and exhibited disease clinical signs.

 

A feeding trial was carried out to investigate the potential probiotic properties of B. subtilis and its suitable level in juvenile M. rosenbergii. Putative B. subtilis bacterium was added to commercial prawn feed as a probiotic. Six types of diets were prepared by mixing the prawn feed with Bacillus form in the ratio of 1:1, 2:1, 3:1, 4:1 and 5:1, with an unsupplemented control. After 60 days, the prawns fed diet at level 3:1, showed a higher mean weight gain (593.45g) or 170.29% increase in growth over control. Clearly, feed treated with B. subtilis appeared to enhance growth and survival of M. rosenbergii at a ratio of 3:1.

 

Another feeding trial was carried out to investigate the suitable methods of administration of B. subtilis to the commercial feed in juvenile M. rosenbergii culture. Four types of diets were prepared by mixing the prawn feed to Bacillus form in the ratio of 3:1 with an unsupplemented as a control. The different methods used were blending, soaking, spraying and bathing. After 60 days, the prawns fed diet under soaking method treated group, showed a higher mean weight gain (1.49 g) or 142.28% increase in growth over control.

 

To investigate the potential probiotic-ability of B. subtilis to combat the freshwater prawn diseases problem, B. subtilis bacterium was added to prawn feed as a probiotic at a level of 10¹⁰ CFU/g feed by soaking method. Sixty days after the start of the B. subtilis feeding, the prawns were challenged by bath exposure to A. hydrophila (10⁷ CFU/ml). After 28 days of post challenge, B. subtilis treated group had 88.33% survival, whereas the control group had only 20.83% survival, with an unhealthy external appearance.

 

After then a feeding experiment was conducted for juvenile M. rosenbergii (0.037 g) using three types of diets prepared with the incorporation of putative B. subtilis, non-putative B. subtilis and a commercial probiotic at level of 10¹⁰ (CFU/g) with an unsupplemented control. After 60 days the prawns fed putative B. subtilis added diets showed a higher suvival, mean weight gain (0.663± 0.017g) with 0.267 g increase in growth over control and best FCR value (2.33 ± 0.02 g).

 

Finally, the probiotic-ability of the B. subtilis was evident from properties consisting dominant isolated one, greatest antagonistic activity against pathogenic agents, highest RI, non-pathogenic to the host, growth enhancement, health improvement and more effectiveness than non-putative and commercial probiotics. This study demonstrated that among putative bacterial flora of juvenile M. rosenbergii, B. subtilis can be a promising probiotic for this prawn.